文献类型：学位论文

中文题名：水解单宁对凡纳滨对虾生长性能、肠道菌群和抗病力的影响

作者：朱旭枫[1];

机构：[1]广东海洋大学;

导师：朱春华;广东海洋大学|郭慧;广东海洋大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：凡纳滨对虾;水解单宁;肠道菌群;副溶血弧菌;抗病力

中文摘要：凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)是我国重要的养殖虾类之一。随着养殖规模的扩大，高密度的养殖模式导致弧菌病频发，造成巨大的经济损失。对虾养殖中防治病害常见的做法是使用抗生素，但长期使用抗生素不仅会通过食物链富集，还会使病原体产生耐药性。因此我国正不断限制养殖业中使用抗生素并寻找有效的抗生素替代物防治病害。水解单宁(Hydrolyzabletannins,HTs)在替代抗生素方面有巨大的潜力，但目前水解单宁在水产动物中的研究较少。　　本试验旨在研究水解单宁对凡纳滨对虾生长性能、免疫、抗氧化能力、肠道菌群和抗副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)能力的影响，为水解单宁在水产养殖中的应用提供理论基础。　　选取600尾凡纳滨对虾作为研究对象，分为5个处理，每个处理3个重复。以基础饲料为对照组（F0组）,在基础饲料中分别添加0.05%（F1组），0.10%（F2组），0.15%（F3组）和0.20%（F4组）的水解单宁作为实验组,进行为期60天的养殖实验。养殖实验结束后，每组选取10尾对虾，设3个重复，在第三腹节处注射0.2mL的副溶血弧菌(2.5×108CFUmL-1)，感染24h后取样。用试剂盒测定血清和肝胰腺相关的酶活性，实时荧光定量实验测定肝胰腺和血细胞相关基因的表达水平，肠道菌群用Illumina技术测序，流式细胞仪处理攻毒24h后对虾的血细胞，综合试验结果分析水解单宁对凡纳滨对虾的影响。　　结果表明：F1-F4增重率(Weightgainrate,WGR)和特定生长率(Specificgrowthrate,SGR)显著高于F0组(P＜0.05)。各组之间的肥满度(Conditionfactor,CF)和存活率(Survival)均无显著性差异(P＞0.05)。实验组不同程度的提高了血清和肝胰腺中的碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALP)、酸性磷酸酶(Acidphosphatase,ACP)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)和胰蛋白酶(Trypsin,TRY)活性(P＜0.05)。0.15%的水解单宁显著提高了过氧化氢酶(Catalase,cat)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Znsuperoxidedismutase,cu/zn-sod)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase,gpx)的表达水平(P＜0.05)。IlluminaMiSeq测序显示水解单宁还改善了凡纳滨对虾的肠道菌群结构。在门水平上，变形菌门(Proteobacteria)比例最高，其次是厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)。在属水平上，发光杆菌属(Photobacterium)，乳杆菌属(Lactobacillus)和玫瑰变色菌属(Roseovarius)的比例增加，寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、弧菌属(Vibrio)和羧酸利用杆菌属(Carboxylicivirg)比例远低于对照组。在感染副溶血弧菌24h后，F3组的相对成活率最高(80%)(P＜0.05)，实验组对虾的血细胞凋亡率，活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)含量和一氧化氮(Nitricoxide,NO)水平显著低于对照组，酯酶活性显著高于对照组(P＜0.05)。实验组凡纳滨对虾血清和肝胰腺的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶，总抗氧化能力(Totalantioxidantcapacity,T-AOC)和溶菌酶(Lysozyme,LZM)活性均显著高于对照组(P＜0.05)。实验组对虾血细胞Toll样受体(Toll-likereceptors,tlr)和热休克蛋白70(Heatshockprotein70,hsp70)基因的表达水平显著上调(P＜0.05)。0.10%和0.15%的水解单宁显著提高了过氧化氢酶、铜锌超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的表达水平(P＜0.05)。　　综上所述，以WGR为判断依据，构建二次曲线回归模型，得出当添加比例为0.11%时效果最好。本试验0.15%比例的水解单宁提高了凡纳滨对虾的生长性能，增强了对虾免疫及抗氧化能力，优化肠道菌群结构。水解单宁还可以提高凡纳滨对虾血细胞和肝胰腺的非特异性免疫能力和抗氧化功能，阻止血细胞氧化损伤的发生，有效清除机体受到刺激产生的活性氧和一氧化氮，增强酯酶活性，减少细胞凋亡，从而提高凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染的能力。

年份：2021