文献类型：期刊文献

中文题名：草鱼(Ctenopharyngodon idellus)NCCRP-1基因的克隆和原核表达

英文题名：cDNA Cloning and Prokaryotic Expression of NCCRP-1 from Grass Carp(Ctenopharyngodon idellus)

作者：蔡佳[1,2,3];代礼平[1,2,3];王蓓[1,2,3];汤菊芬[1,2,3];黄郁葱[1,2,3];鲁义善[1,2,3];吴灶和[2,3,4];简纪常[1,2,3]

机构：[1]广东海洋大学水产学院,湛江524088;[2]广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,湛江524088;[3]广东省水产经济动物病害控制重点实验室,湛江524088;[4]仲恺农业工程学院,广州510225

年份：2013

卷号：29

期号：11

起止页码：105

中文期刊名：生物技术通报

外文期刊名：Biotechnology Bulletin

收录：CSTPCD、、北大核心2011、CSCD_E2013_2014、北大核心、CSCD

基金：国家"973"计划项目(2009CB118704)

语种：中文

中文关键词：草鱼;NCCRP-1;克隆;原核表达

外文关键词：Ctenopharyngodon idellus NCCRP-1 Clone Prokaryotic expression

中文摘要：应用RACE PCR克隆了草鱼NCCRP-1基因。结果表明,NCCRP-1cDNA全长900 bp,开放阅读框为714 bp,编码237个氨基酸残基,预测分子量为27.3 kD,理论等电点为5.63。草鱼NCCRP-1具有NCCRP-1蛋白家族保守的功能区域,与鲤鱼该基因(Cyprinus carpioL.)的相似性为88%。将此基因定向插入原核表达载体pET-32a,构建重组质粒pET-NCCRP后转化BL2(1DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示在47.8 kD处出现特异性蛋白条带,Western blot检测表明草鱼NCCRP-1融合蛋白成功表达。

外文摘要：In the present study, grass carp （ Ctenopharyngodon idellus ） NCCRP-1 gene was cloned using RACE method. The full length cDNA of NCCRP-1 was 900 bp containing a 714 bp open reading frame （ ORF ）, which encoded 237 amino acids with predicted molecular mass of 27.3 kD and a theoretical pI of 5.63. Amino acid alignment indicated that grass carp NCCRP-1 possessed consensus functional domians of NCCRP-1 family and shared 88% similarity with common carp NCCRP-1, The prokaryotic expression vector pET-NCCRP was constructed and then transformed into BL21 （ DE3 ） . SDS-PAGE and Western blotting analysis indicated that the recombinant protein of grass carp NCCRP-1 was successfully expressed and molecular weight of expressed fusion protein was 47.8 kD.