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方斑东风螺吻管水肿病病原菌的初步研究
《渔业现代化》黄郁葱 简纪常 吴灶和 鲁义善 王蓓  出版年:2009
从患病方斑东风螺(Babylonia areolata)分离到一株致病菌Balo001,运用生理生化方法并结合分子生物学方法对病原菌进行分类鉴定,并对病原菌进行药敏分析及半致死剂量(LD50)测定。结果表明:致病菌Ba-...
关键词:方斑东风螺  吻管水肿病  哈氏弧菌  被引量:19
溶藻弧菌外膜蛋白对凡纳滨对虾免疫功能的影响
《热带海洋学报》吴灶和 曹剑香 简纪常 鲁义善  出版年:2005
应用溶藻弧菌外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)注射凡纳滨对虾Penaeus vannamei,测定其对凡纳滨对虾免疫指标的影响以及对凡纳滨对虾的免疫保护作用。注射OMP0.5、1.0和1.5...
关键词:凡纳滨对虾Penaeus  vannamei  外膜蛋白  免疫指标  免疫保护  被引量:15
凡纳滨对虾血清凝集素、溶血素的特性研究
《海洋科学》曹剑香 简纪常 吴灶和 鲁义善  出版年:2006
对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的血清凝集素和溶血素部分特性的研究结果表明,凡纳滨对虾血清凝集素热稳定性较差,温度高于50℃时,活性呈明显减弱至无活性,其最适温度为25~45℃;最适pH为8~9;...
关键词:凡纳滨对虾(Litopenaeus  vannamei)  凝集素  溶血素  被引量:13
哈维氏弧菌外膜蛋白OmpW基因克隆、表达及DNA疫苗的免疫效果
《水产学报》黄浦江 黄郁葱 简纪常 吴灶和 鲁义善 张雪利  出版年:2013
参照GenBank上登录的哈维氏弧菌外膜蛋白OmpW基因序列,设计引物扩增OmpW的开放阅读框,序列分析结果显示该基因全长645bp。将其定向克隆到原核表达载体pET-32a(+),在大肠杆菌BL21中成功表达出带His...
关键词:哈维氏弧菌  外膜蛋白  OmpW  免疫原性  DNA疫苗  被引量:8
ABC转运蛋白结构及其在细菌致病性中的研究进展
《生物技术通报》陈福暖 黄瑜 蔡佳 王忠良 简纪常 王蓓  出版年:2022
ABC转运蛋白,即腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter)是具有多种功能且分布极为广泛的膜蛋白质家族。它的主要功能是利用ATP水解产生的能量来实现对底物的跨膜转运,AB...
关键词:ABC转运蛋白  原核生物  致病性  毒力  耐药性  被引量:7
溶藻弧菌诱导凡纳滨对虾消减文库的构建及其表达序列标签分析
《水生生物学报》蔡小辉 鲁义善 吴灶和 简纪常 王蓓 蔡双虎  出版年:2010
利用抑制消减杂交技术构建了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)诱导的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血淋巴细胞cDNA文库。用DNAMAN5.2.2软件对560条高质量的ESTs进行...
关键词:凡纳滨对虾  溶藻弧菌  抑制消减杂交(SSH)  表达序列标签(EST)  被引量:7
地高辛标记的DNA探针制备及其应用于溶藻弧菌的检测
《华中农业大学学报》周凤丽 简纪常 吴灶和  出版年:2009
从基因库中获取溶藻弧菌的胶原蛋白酶基因序列和外膜蛋白基因序列,根据基因的保守性用DNAStar分别设计2对引物,分别对溶藻弧菌基因组进行PCR扩增,用地高辛标记扩增的特异DNA片段以制备探针。分别用胶原蛋白酶DNA探针和...
关键词:溶藻弧菌  胶原蛋白酶DNA探针  外膜蛋白DNA探针  斑点杂交  被引量:6
溶藻弧菌T3SS exsD基因敲除突变株构建及其表型特征
《广东海洋大学学报》王俊霖 招茵 苏茵茵 周诗慧 曾福源 谢妙 王娜 简纪常 庞欢瑛  出版年:2021
【目的】构建溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS)中的调控蛋白操纵子ExsD基因缺失株,研究exsD缺失株表型特征。【方法】采用ove...
关键词:溶藻弧菌  Ⅲ型分泌系统  exsD基因  基因敲除  缺失株  表型特征  被引量:6
鱼类非特异性细胞毒性细胞(NCC)的研究进展
《中国水产科学》魏世娜 简纪常 吴灶和 鲁义善 闫秀英  出版年:2010
自然杀伤细胞(NK)进化上的前体细胞在鱼类中被称作非特异性细胞毒性细胞(NCC),主要来源于血液和淋巴器官,是防御细菌、病毒、寄生性原生动物等入侵的第一道防线,在非特异性免疫中起重要作用,还具有体外杀伤肿瘤细胞的功能。近...
关键词:非特异性细胞毒性细胞  分离鉴定  NCC受体  被引量:6
温度对溶藻弧菌HY9901株致病性相关蛋白的调控
《水生生物学报》庞欢瑛 吴灶和 简纪常 鲁义善  出版年:2008
将溶藻弧菌HY9901株置于15℃、20℃、28℃、37℃四个温度下培养,18h时分别测定细菌含量,胞外蛋白酶(Extracelluar protease,ECPase)表达量以及胞外产物(Extracellular p...
关键词:溶藻弧菌  胞外产物  外膜蛋白  胞外蛋白酶  温度  被引量:4
鲍消化道及其养殖水体异养菌的耐药性研究
《南方水产科学》孙永婵 王瑞旋 赵曼曼 曹超 鲁义善 姚托 王江勇  出版年:2017
采用纸片扩散法对分离自福建省皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)消化道及其养殖水体中的284株异养细菌(其中消化道菌131株,水体菌153株)进行药物敏感测试,以期了解其耐药性概况。结果显示,皱纹盘鲍...
关键词:皱纹盘鲍  异养细菌  抗菌药物  耐药率  多重耐药性  被引量:4
红笛鲷主要组织相容性复合物Ⅰα抗原基因的克隆与表达分析
《水产学报》张新中 鲁义善 吴灶和 简纪常  出版年:2012
为研究红笛鲷免疫防御相关基因的作用机理和调控机制,实验应用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)成功克隆了红笛鲷组织相容性复合物Ⅰα(MHCⅠα)抗原基因的...
关键词:红笛鲷  主要组织相容性复合物Ⅰα(MHCⅠα)  原核表达  克隆  cDNA末端快速扩增技术(RACE)  被引量:4
超声波平板法检测溶藻弧菌HY9901生物被膜的研究
《水产科学》王蓓 吴灶和 简纪常 鲁义善 汤菊芬 黄郁葱  出版年:2009
以溶藻弧菌为研究对象,对定量检测生物被膜的超声波平板法进行条件优化,对优化的超声波平板法与平板擦拭法进行比较,并采用银染法进行验证。试验结果表明,优化的超声波平板法的最佳条件为:超声波功率120 W,处理14 min,处...
关键词:生物被膜  溶藻弧菌  超声波平板法  优化条件  被引量:3
尼罗罗非鱼NITR基因的克隆鉴定与组织表达分析
《生物技术通报》汪志文 黄瑜 张海艳 汤菊芬 简纪常 鲁义善  出版年:2017
从尼罗罗非鱼脾脏组织中克隆获得新型免疫受体(NITR,Novel immune-type receptor)基因的编码区序列(Gen Bank登录号:KX989509;命名为On-NITR),该基因c DNA全长1 11...
关键词:尼罗罗非鱼  NITR蛋白  基因克隆  组织表达分析  被引量:2
溶藻弧菌PEPCK蛋白原核表达及其乙酰化、琥珀酰化修饰的鉴定
《生物技术通报》曾福源 苏泽辉 周诗慧 谢妙 庞欢瑛  出版年:2021
构建溶藻弧菌HY9901 PEPCK蛋白的原核表达载体、优化其表达条件,并鉴定该蛋白的乙酰化及琥珀酰化修饰。采用PCR克隆pepck基因,构建pET-28a-pepck并将其转入大肠杆菌BL21(DE3),对重组菌株的培...
关键词:溶藻弧菌  PEPCK蛋白  原核表达  乙酰化  琥珀酰化  被引量:2
吉富罗非鱼sIgM基因多克隆抗体的制备及组织定位分析
《水产学报》王培 王蓓 鲁义善 蔡佳 汤菊芬 吴灶和 简纪常  出版年:2014
为研究sIgM在吉富罗非鱼体内的组织分布及其在亚细胞水平上的定位,本实验利用纯化的SIGM融合蛋白,按照常规方法免疫新西兰大白兔,制备了兔抗吉富罗非鱼SIGM多克隆抗体;并对吉富罗非鱼肠、脾脏及鳃组织进行了免疫组织化学分...
关键词:吉富罗非鱼  SIGM  多克隆抗体  组织定位  被引量:2
用免疫蛋白质组学方法筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白
《水产学报》李岩 庞欢瑛 鲁义善 吴灶和 简纪常  出版年:2010
用免疫蛋白质组学的研究方法鉴定了哈氏弧菌的免疫反应蛋白。将哈氏弧菌接种于TSB培养基28℃培养18h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,一向电泳采用7cmpH4~7的胶条进行等电聚焦,二向用12.5%的SDS-PA...
关键词:哈氏弧菌  免疫蛋白质组学  全菌可溶性蛋白  双向电泳  被引量:1
斜带石斑鱼热休克蛋白基因HSP70在LPS和Poly I∶C刺激下的表达分析及重组蛋白制备
《大连海洋大学学报》梁振宇 邹子鸿 汤菊芬 黄瑜 简纪常 蔡佳  出版年:2021
为了解斜带石斑鱼Epinephelus coioides热休克蛋白(HSP70)基因(EcHSP70,GenBank登录号MW411059)在石斑鱼抗病原感染中的功能,采用荧光定量PCR检测了LPS与Poly I∶C刺激...
关键词:斜带石斑鱼  HSP70基因  表达分析  原核表达  脂多糖  聚肌胞  被引量:1
尼罗罗非鱼S100A16基因克隆及其功能分析
《南方农业学报》陈钊峰 苏海明 黄瑜 鲁义善 王蓓 简纪常 蔡佳  出版年:2023
【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)钙结合蛋白S100A16的结构特征、系统进化关系及组织表达分布情况等,进一步分析S100A16在抗菌免疫中的作用,为深入研究S100A16基因在鱼类免疫...
关键词:尼罗罗非鱼  S100A16  融合蛋白  淋巴细胞  抗菌免疫  被引量:1
罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)新型AI-2信号分子受体RbsB蛋白结晶生长研究
《海洋与湖沼》樊博琳 潘丽霞 王忠良 黎源 简纪常 王蓓  出版年:2020
为了开展无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)核糖结合蛋白(Ribose binding protein B,RbsB)结构功能的研究,本实验根据已知无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计相关引物...
关键词:无乳链球菌  RbsB蛋白  蛋白纯化  结晶化  被引量:1
海水亚硝酸氧化细菌初始富集过程中硝酸盐的定性检测
《水生生物学报》郭青 吴灶和 钱鸣亮  出版年:2005
本文对海水亚硝酸氧化细菌初始富集过程中硝酸盐的定性检测方法及其适用范围进行了研究。结果表明, 在NaNO2起始浓度为100mg/L的亚硝酸氧化细菌初始富集培养系统中,1mL培养液中残余的NaNO2,可先用 1.0mol/...
关键词:亚硝酸氧化细菌  硝酸盐  定性检测  被引量:1
尼罗罗非鱼CD2-like基因克隆及其胞外区表达研究
《水产科学》陈福暖 高晓琳 曾晓怜 谢彩霞 汪志文 鲁义善 吴灶和 王忠良 王蓓  出版年:2021
依据数据库中预测的尼罗罗非鱼白细胞分化抗原2(CD2)基因(GenBank登录号:XM_005460661.4)序列,采用PCR扩增体质量(150±50)g尼罗罗非鱼CD2分子同源类似物(CD2-like)基因编码区片段...
关键词:尼罗罗非鱼  CD2-like基因  基因克隆  原核表达  被引量:0
草鱼细胞系CIK酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用
《生物技术通报》闫秀英 谢吉国 李杰 丁燏 吴灶和 鲁义善 简纪常  出版年:2014
旨在探索草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞蛋白质间的相互作用,运用SMART技术构建了草鱼肾组织细胞系CIK(Ctenopharyngodon idellus kidney)的酵母双杂交cDNA文库。提取CIK细胞总RNA后,分离...
关键词:草鱼肾组织细胞系  酵母双杂交  cDNA文库  蛋白质互作  被引量:0
溶藻弧菌磷酸甲基嘧啶合酶(ThiC)的原核表达及其乙酰化修饰鉴定
《大连海洋大学学报》王旭东 范晨龙 丁燏  出版年:2022
为研究溶藻弧菌Vibrio alginolyticus磷酸甲基嘧啶合酶(phosphomethylpyrimidine synthase,ThiC)是否存在乙酰化修饰,以溶藻弧菌HY9901基因组为模板,PCR扩增Thi...
关键词:溶藻弧菌  磷酸甲基嘧啶合酶  原核表达  乙酰化  被引量:0
利用酵母双杂交系统筛选与鉴定石斑鱼EcBAG3互作因子
《生物技术通报》蔡佳 梁振宇 黄瑜 鲁义善 施钢 简纪常  出版年:2022
以参与石斑鱼抗病毒免疫反应的EcBAG3蛋白为研究对象,采用酵母双杂交等技术筛选与鉴定EcBAG3的互作蛋白。首先构建了石斑鱼脾脏细胞的酵母双杂交cDNA文库,文库的容量为5.6×10^(6) CFU,插入片段的平均长度...
关键词:石斑鱼  酵母双杂交  BAG3  互作蛋白  被引量:0
鱼诺卡氏菌培养条件及培养基的优化
《南方水产科学》夏立群 王蓓 夏洪丽 黄郁葱 简纪常 鲁义善  出版年:2013
对鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolea)ZJ0503的增菌培养基和生长条件进行优化。研究了温度、盐度、初始pH对鱼诺卡氏菌生长的影响,并通过单因素试验对培养基的碳源、氮源和无机盐成分进行了筛选,采用正交试验...
关键词:鱼诺卡氏菌  培养基  培养条件  优化  被引量:0
应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库
《水产学报》王蓓 吴灶和 简纪常 鲁义善  出版年:2007
应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余...
关键词:溶藻弧菌  cDNA文库  限制性显示PCR  被引量:0
尼罗罗非鱼CD63基因克隆及表达特征分析
《南方农业学报》李梓昕 陈杨慧 卢春兰 黄瑜 蔡佳 王蓓  出版年:2024
【目的】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)抗原分化簇63基因(CD63)并分析其在病原菌刺激后的表达情况,探究尼罗罗非鱼CD63基因在免疫应答中发挥的作用,为进一步研究CD63的免疫功能提供理论...
关键词:尼罗罗非鱼  CD63基因  组织表达  无乳链球菌  被引量:0
斜带石斑鱼T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)基因表达及重组蛋白制备
《大连海洋大学学报》李金泽 汤菊芬 黄瑜 简纪常 施钢 蔡佳  出版年:2022
为研究斜带石斑鱼Epinephelus coioides T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)...
关键词:斜带石斑鱼  T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4  基因表达  LPS  Poly IC  重组蛋白  被引量:0
凡纳滨对虾ATG13基因克隆及其功能分析
《南方农业学报》黎国建 袁韵昊 钟键 骆俊良 杨世平  出版年:2024
【目的】克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)自噬相关基因13(ATG13),并分析凡纳滨对虾ATG13基因的组织表达特征及其在外源刺激后的表达变化,为探究ATG13基因在凡纳滨对虾抗病原感染过程中的...
关键词:凡纳滨对虾  ATG13基因  自噬  哈维氏弧菌  Poly(I:C)  被引量:0
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